微生物法測定泛酸的方法學(xué)考察

泛酸是輔酶A（CoA）和酰基載體蛋白（ACP）生物合成的重要前體物質(zhì)，參與人體中類固醇、褪黑激素、抗體和亞鐵血紅素的合成，是維持生命正常生理機(jī)能的必需小分子有機(jī)物，也是嬰幼兒乳粉中重要的營養(yǎng)物質(zhì)。

目前的兩種方法——微生物法和高效液相色譜法都可以用于檢測奶粉等嬰幼兒食品中的泛酸，結(jié)果具有可比性。微生物法法測定泛酸含量靈敏度高，其標(biāo)準(zhǔn)曲線相關(guān)系數(shù)、回收率和相對標(biāo)準(zhǔn)偏差方面，檢測結(jié)果都較好。而高效液相色譜法的檢測速度較慢、成本較高，所以采用微生物法進(jìn)行大量樣本的測定，被美國AOAC所推薦，也是我國國家標(biāo)準(zhǔn)檢驗(yàn)方法的仲裁法。

但該方法操作步驟較多，微生物生長的不確定性強(qiáng)也會影響結(jié)果。注意這些可能存在的影響因素，可以保證測量結(jié)果的穩(wěn)定和準(zhǔn)確。有人研究發(fā)現(xiàn)，對泛酸檢驗(yàn)結(jié)果影響**的是試樣前處理（存在泛酸損失）及稀釋（包括容量瓶、吸量管、量筒等玻璃器具的校準(zhǔn)和室溫對液體體積的影響），其次是標(biāo)準(zhǔn)溶液的配制。另一項(xiàng)研究則發(fā)現(xiàn)，是微生物因素引起的吸光度曲線偏離線性影響**，因此建議在日常監(jiān)測中，減少微生物培養(yǎng)環(huán)境因素的波動(dòng)，對培養(yǎng)環(huán)境實(shí)時(shí)更嚴(yán)格的控制。

關(guān)于微生物法測泛酸的精密度，有人對14個(gè)嬰兒配方奶粉的泛酸含量進(jìn)行了測定，進(jìn)行了28次相對誤差和20次回收率的觀察，發(fā)現(xiàn)75%的結(jié)果相對誤差都<10%，回收率有80%在90~110%之間，說明該方法用于檢測奶基嬰幼兒食品是可行的。

又有研究發(fā)現(xiàn)，標(biāo)準(zhǔn)曲線在0~50ng/ml范圍內(nèi)，線性關(guān)系較好。同時(shí)提出幾點(diǎn)注意事項(xiàng)，要注意無菌操作；避免菌種污染；玻璃器皿要嚴(yán)格清洗；必要的話，樣本多做幾個(gè)稀釋度的實(shí)驗(yàn)；降溫過程中，要將試管浸入冷水中，使其迅速降溫，避免沉淀和顏色產(chǎn)生；用軟件擬合4次泛酸標(biāo)準(zhǔn)曲線。

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