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簡述無血清培養(yǎng)基的優(yōu)缺點

2018-11-22 12:59來源:締一生物

近年來,隨著生物醫(yī)藥技術的快速發(fā)展,細胞培養(yǎng)技術廣泛應用于免疫學、商業(yè)應用和生物制品等多個領域。細胞培養(yǎng)技術可用于分離、增殖和鑒定病毒,也適用于篩選抗癌藥物和對有毒物質(zhì)進行檢測等方面的研究。


可以利用細胞培養(yǎng)技術進行大規(guī)模生物制品研發(fā),如單克隆抗體、疫苗及重組蛋白的制備、藥物開發(fā)、干細胞移植、人造器官培養(yǎng)等。因此,細胞培養(yǎng)技術已成為科學研究和醫(yī)藥制品開發(fā)的關鍵因素之一。


細胞培養(yǎng)技術中使用的培養(yǎng)基主要包括合成細胞培養(yǎng)基和天然細胞培養(yǎng)基,其中應用廣泛的是天然培養(yǎng)基。血清是一種在體外培養(yǎng)細胞時加入的物質(zhì),它是在血漿中去除纖維蛋白原而分離出的一種成分十分復雜的混合物,用于細胞培養(yǎng)的血清主要是牛血清。



血清中富含細胞生長所必需的營養(yǎng)物質(zhì),在細胞培養(yǎng)過程中具有重要作用但實際生產(chǎn)中血清提取工藝復雜,成本高昂,給大規(guī)模生產(chǎn)帶來困難,不利于商業(yè)化開發(fā),且血清成分復雜,無法有效質(zhì)控,常見細胞源疫苗血清殘留對疫苗免疫效果有很大的影響。


疫苗生產(chǎn)多采用M199、DMEM、MEM等培養(yǎng)基加新生牛血清的方式,但由于血清成分的復雜性和不確定性,疫苗生產(chǎn)企業(yè)期待新型無血清培養(yǎng)基的上市。近年來,市面上出現(xiàn)了無血清培養(yǎng)基。無血清培養(yǎng)已成為包括疫苗在內(nèi)的生物技術藥物生產(chǎn)的總趨勢。由于無血清培養(yǎng)基可完全采用已知分子結(jié)構(gòu)或構(gòu)型組分的低蛋白, 甚至完全不采用蛋白組分, 因此被廣泛應用于細胞工程領域。


締一生物為您介紹一款可無血清培養(yǎng)的細胞培養(yǎng)基,由國際上HiMedia公司生產(chǎn)M199改良型——SFRE 199細胞培養(yǎng)基。SFRE 199分為I型和II型,即SFRE 199-1和SFRE 199-2。開始研發(fā)是為了生長和維持培養(yǎng)Bak細胞(原代狒狒腎細胞)。


SFRE-199將M199標準配方中的精氨酸增加到150mg/L,半胱氨酸增至4mg/L,胱氨酸增至40mg/L,谷氨酰胺增至300mg/L,谷氨酸增至75mg/L,甘氨酸增至100mg/l,組氨酸增至40mg/L,酪氨酸增至80mg/L,以獲得較好的細胞生長而未表現(xiàn)出毒性。另外,還降低了硝酸鐵、黃嘌呤和碳酸氫鈉的濃度。SFRE 199-1與SFRE 199-2的不同在于,前者含有Hank's鹽,而后者所含為Earle's鹽。與加胎牛血清的常規(guī)培養(yǎng)基比較,細胞生長速率、產(chǎn)量和蛋白容量均相同。均在移植后第6天單層細胞達到充分融合。


有報道,在SFRE 199-1生長的原代Bak細胞的群體二倍分裂時間(PDT)約為34.2小時,與加有5%牛血清的HLH(含水解乳白蛋白的HBSS)相同,加有3%胎牛血清的M199的PDT為36小時。如果在SFRE 199-1中去除胰島素或硫酸鋅,則細胞不能融合,PDT延長。若含有胰島素和硫酸鋅,則其支持生長的能力相當于標準對照血清培養(yǎng)基。


近年來,無血清培養(yǎng)基的應用越來越廣泛,但也各有利弊,本文締一生物為您介紹無血清培養(yǎng)基的主要優(yōu)缺點:


優(yōu)點:

①無血清培養(yǎng)基不含血清,提高了實驗的重復性、準確性和穩(wěn)定性;

②避免了血清所帶來的血源性污染等問題,減少血清未知成分對細胞的損傷;

③無血清培養(yǎng)基中的蛋白質(zhì)來源于重組蛋白或蛋白水解產(chǎn)物,提高了實驗效率;

④無血清培養(yǎng)基的成分和含量相對明確,能提高細胞產(chǎn)品的質(zhì)量并有利于產(chǎn)物的分離提純;⑤無血清培養(yǎng)基在生物醫(yī)藥等領域有著極大的應用潛能;

⑥制備流程簡易,操作簡單。


缺點:

①無血清培養(yǎng)基的生產(chǎn)成本較高,不利于商業(yè)化開發(fā)與應用;

②目前低血清培養(yǎng)基研究開發(fā)的相關數(shù)據(jù)缺乏在線交流,可查閱的資料有限,不能有效促進細胞馴化技術的發(fā)展;

③多數(shù)無血清培養(yǎng)基的應用不廣泛,通用性較低,不具有普遍性;

④細胞在無血清培養(yǎng)基中,對外界條件如物理和化學等因素的改變較敏感。  


締一生物作為HiMedia公司在中國的代理商,在細胞培養(yǎng)、微生物培養(yǎng)和檢測領域,一如既往地為您帶來優(yōu)質(zhì)的服務。


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