Vero細(xì)胞無血清培養(yǎng)基在流感疫苗中的應(yīng)用

流行性感冒（Influenza）簡稱流感，是由流感病毒（Influenza Virus）引起的急性呼吸道疾病，流感病毒具有高度的傳染性和較強(qiáng)的變異性，每年在全球各個國家呈季節(jié)性流行和地區(qū)性爆發(fā)，甚至世界范圍內(nèi)流行。

面對流感侵襲，人們主要通過勤洗手、帶口罩或開展公眾教育等措施進(jìn)行預(yù)防，但這些措施并不十分有效。為有避免流感的侵襲，20世紀(jì)40年代，人們通過雞胚擴(kuò)增得到的流感疫苗株，用于人類的流感預(yù)防效果顯著。目前，正在使用或正在研發(fā)的針對流感的疫苗包括全病毒疫苗、裂解疫苗、亞單位疫苗及冷適應(yīng)減毒活疫苗仍是使用雞胚為培養(yǎng)基質(zhì)生產(chǎn)的，然而大流感發(fā)生時(shí)不斷増長的疫苗和疫情防控需求使雞胚生產(chǎn)平臺中雞胚供應(yīng)不足、卵清蛋白過敏及產(chǎn)量有限等諸多缺陷越來越明顯。

迫切需要找到一種能快速生產(chǎn)安全有效的流感疫苗的介質(zhì)，世界衛(wèi)生組織（WHO）推薦利用哺乳動物細(xì)施培養(yǎng)技術(shù)替代雞胚培養(yǎng)技術(shù)生產(chǎn)流感疫苗。利用細(xì)胞培養(yǎng)生產(chǎn)流感疫苗具有顯著的優(yōu)點(diǎn)：①細(xì)胞培養(yǎng)系統(tǒng)操作簡單，可實(shí)現(xiàn)大規(guī)模培養(yǎng)；②細(xì)胞培養(yǎng)系統(tǒng)中繁殖的病毒與原流感病毒分離株的匹配度更高；③雞胚生產(chǎn)的流感疫苗可能引發(fā)人體過敏反應(yīng)，而通過細(xì)胞培養(yǎng)制備的疫苗可克服此缺點(diǎn)。

目前可用于流感疫苗生產(chǎn)的細(xì)胞系主要有狗腎腫瘤細(xì)胞系（MDCK）、非洲綠猴腎細(xì)胞系（Vero）、人視網(wǎng)膜細(xì)胞系（PER.C6）等。其中Vero細(xì)胞系是世界衛(wèi)生組織（WHO）和我國生物制品規(guī)程推薦的人用疫苗生產(chǎn)細(xì)胞系，已成功應(yīng)用于包括流感疫苗在內(nèi)的多種疫苗的生產(chǎn)，其安全性已得到充分認(rèn)證。

在疫苗生產(chǎn)過程中，為了獲得高滴度、高質(zhì)量的病毒液，需要高密度的細(xì)胞提供病毒復(fù)制的基質(zhì)，為實(shí)現(xiàn)細(xì)胞的高密度培養(yǎng)，在體外培養(yǎng)細(xì)胞時(shí)會添加一定量的血清，血清可提供細(xì)胞生長所需的必需營養(yǎng)物質(zhì)，如貼壁生長因子、激素、微量元素、載體蛋白等。

使用血清也會有很多的不足：①血清容易引起細(xì)菌、真菌、病毒及支原體的污染，會增加疫苗生產(chǎn)的安全性隱患；②血清的質(zhì)量在批次間存在很大的差異，影響疫苗生產(chǎn)工藝的穩(wěn)定性和疫苗質(zhì)量控制；③血清成分復(fù)雜，含有多種蛋白質(zhì)、激素、生長因子等，増加疫苗等產(chǎn)品連續(xù)純化過程的難度；④血清價(jià)格昂貴，在產(chǎn)品規(guī)模化生產(chǎn)時(shí)會増加放大成本；⑤血清中含有能促進(jìn)細(xì)胞生長的物質(zhì)，但也含有一些對細(xì)胞有毒性作用和抑制作用的物質(zhì)，影響細(xì)胞的生長，血清使用造成的細(xì)胞培養(yǎng)過程和疫苗生產(chǎn)的安全性問題及生產(chǎn)成本増加的問題，成為動物細(xì)胞無血清培養(yǎng)技術(shù)研究和應(yīng)用的發(fā)展動因，因此，基于細(xì)胞和產(chǎn)品特性的無血清培養(yǎng)基研制己成為細(xì)胞工程領(lǐng)域的重要課題。

  例如：HiMedia公司生產(chǎn)的基礎(chǔ)培養(yǎng)基SFRE系列，是基礎(chǔ)培養(yǎng)基M199的改良款，該系列分為SFRE199-1和SFRE199-2，可用于培養(yǎng)Vero細(xì)胞。與M199相比主要區(qū)別是提高了葡萄糖和氨基酸的濃度，降低了硝酸鐵、黃嘌呤和碳酸氫鈉的濃度。另外加入硫酸鋅、丙酮酸鈉和魚精蛋白鋅胰島素。

SFRE 199-1有Hank's鹽；SFRE 199-2含有Earle's鹽，兩款均不含胰島素，需要使用前自行添加。可無血清培養(yǎng)，與加胎牛血清的常規(guī)培養(yǎng)基比較，細(xì)胞生長速率、產(chǎn)量和蛋白容量均相同，均在移植后第6天單層細(xì)胞達(dá)到充分融合。

締一生物作為HiMedia公司在中國的代理商，在細(xì)胞培養(yǎng)、微生物培養(yǎng)和檢測領(lǐng)域，一如既往地為您帶來優(yōu)質(zhì)的服務(wù)。

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