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無(wú)血清的培養(yǎng)基的組成介紹

2018-12-24 11:04來(lái)源:締一生物


無(wú)血清培養(yǎng)基(serum free medium,SFM)是繼天然培養(yǎng)基、有血清合成培養(yǎng)基之后研制的一類(lèi)既能滿足細(xì)胞在體外較長(zhǎng)時(shí)間生長(zhǎng)繁殖又無(wú)需添加血清避免外源物質(zhì)污染的合成培養(yǎng)基,是目前及未來(lái)生物工程領(lǐng)域的一大趨勢(shì)。無(wú)血清培養(yǎng)基成分較明確,制備簡(jiǎn)單,采用無(wú)血清培養(yǎng)技術(shù)可適當(dāng)降低生產(chǎn)成本,增加目的產(chǎn)物表達(dá)并其簡(jiǎn)化分離純化步驟,避免外源病毒污染。



無(wú)血清培養(yǎng)基由營(yíng)養(yǎng)較完全的基礎(chǔ)培養(yǎng)基和補(bǔ)充因子而組成。

基礎(chǔ)培養(yǎng)基


1950年Morgan等在前人的研究基礎(chǔ)上研究出199培養(yǎng)基,是動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)基發(fā)展到一個(gè)嶄新的階段,即合成培養(yǎng)基階段。在不同細(xì)胞培養(yǎng)時(shí),根據(jù)細(xì)胞需求對(duì)成分已知的基礎(chǔ)培養(yǎng)基組分進(jìn)行適當(dāng)調(diào)整即可使細(xì)胞更好地生長(zhǎng)并提高目的產(chǎn)物的表達(dá)量。如HiMedia公司生產(chǎn)的SFRE199,是在M199的基礎(chǔ)上進(jìn)行改良的。


SFRE 199與M199的不同點(diǎn)在于升高了8種氨基酸(精氨酸-鹽酸、半胱氨酸、胱氨酸、L -谷氨酰胺、L -谷氨酸、甘氨酸、組氨酸、酪氨酸)和葡萄糖的濃度,細(xì)胞生長(zhǎng)較好且未體現(xiàn)出毒性,并加入硫酸鋅、丙酮酸鈉和魚(yú)精蛋白鋅胰島素。另外,還降低了硝酸鐵、黃嘌呤和碳酸氫鈉的濃度。SFRE 199-1與SFRE 199-2的不同在于,前者含有Hank's鹽,而后者所含為Earle's鹽。


主要添加因子


又稱(chēng)補(bǔ)充因子,是代替血清的各種因子的總稱(chēng)。多數(shù)無(wú)血清培養(yǎng)液必須補(bǔ)加3-8種因子。胰島素、亞硒酸鈉和轉(zhuǎn)鐵蛋等白是必須補(bǔ)充因子,其他多數(shù)為輔助作用的因子。按其功能不同,補(bǔ)充因子可分為四類(lèi):

激素和生長(zhǎng)因子。

很多細(xì)胞用無(wú)血清培養(yǎng)時(shí)需要加入激素,如胰島素、生長(zhǎng)激素、胰高糖素等。胰島素是重要的細(xì)胞存活因子,與細(xì)胞上的胰島素受體結(jié)合后可促進(jìn)RNA、蛋白質(zhì)和脂肪酸的合成,抑制細(xì)胞凋亡。此外,雌二醇、孕酮、氫化可的松等也是無(wú)血清培養(yǎng)基中常添加的補(bǔ)充因子。

結(jié)合蛋白。

轉(zhuǎn)鐵蛋白與細(xì)胞上的轉(zhuǎn)鐵蛋白受體結(jié)合是細(xì)胞獲取鐵元素的主要來(lái)源,白蛋白與脂類(lèi)、激素、維生素、金屬離子和生長(zhǎng)因子結(jié)合后可調(diào)節(jié)上述物質(zhì)在無(wú)血清培養(yǎng)基中活性。

貼壁因子。

在無(wú)血清培養(yǎng)基中加入纖粘連蛋白、膠原和多聚賴氨酸等貼壁因子可減少細(xì)胞貼壁的時(shí)間,實(shí)現(xiàn)更好地培養(yǎng)。

其他補(bǔ)充因子。

一些細(xì)胞培養(yǎng)使用的無(wú)血清培養(yǎng)基還需補(bǔ)充微量元素、維生素、脂類(lèi)等低分子量物質(zhì)。


締一生物作為HiMedia公司在中國(guó)的代理商,在細(xì)胞培養(yǎng)、微生物培養(yǎng)及檢測(cè)領(lǐng)域,一如既往地為您帶來(lái)優(yōu)質(zhì)的服務(wù)。


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