HiMedia產品解疑
(使用脫水培養基經常遇到的問題)
問題
可能的原因
建議
pH值不對
1.過熱
2.滅菌時間太長
3.使用了堿性玻璃,容器內有殘留或水不純
4.反復熔化,導致成分水解
5.在高溫下保存太久
6.在25℃以上測量的pH值
7.蒸餾水的初始pH值有問題
1.XLD瓊脂(M031)標準顏色——紅色透明
2.蒸餾水呈酸性pH值,使得XLD瓊脂呈現霧狀。
1.不要過熱。
2.滅菌應按規定的時間和溫度進行。
3.檢查玻璃器皿的pH值。
4.僅取所需數量的培養基進行復溶,并避免多次重熔。避免準備過量的培養基。
5.將培養基存放在干燥通風的室內,避免極端的溫度。
6.含有碳水化合物的培養基過熱,會導致pH值急劇變化
7.蒸餾水的pH值應在6.0-7.0之間。
因此,應嚴格按照規定進行滅菌。對于含有額外添加碳水化合物的培養基,應將培養基和碳水化合物分別滅菌再混勻。
不完全溶解
1.加熱不充分,缺少攪拌
2.在25℃以上測量的pH值
3.用的容器太小(偶爾有些培養基自身即帶沉淀,如BS瓊脂)
4.容器有殘留或使用了堿性玻璃
1.滅菌前煮沸培養基。
2.檢查蒸餾水的pH值。pH值應在6.0-7.0之間
3.使用足夠大的容器。
4.檢查玻璃器皿的pH值。
培養基變暗
1.培養基過度加熱
2.培養基稱重不正確,過量
3.不正確的pH值
4. 反復熔化
5.培養基過期或變質
2.不要加入過量的干粉。按照克/升復溶干粉。
3.檢查蒸餾水的pH值,應為6.0-7.0
4.避免再熔和再制備培養基。
5.在有效期內使用培養基。
凝膠變軟
1.瓊脂沒在溶液中,脫水培養基沒完全復溶
2.瓊脂發生酸水解
3.加入接種液導致瓊脂稀釋,而未能補足。
1.檢查蒸餾水的pH值。 蒸餾水的pH應該介于6.0-7.0之間。
2.蒸餾水的酸性pH導致瓊脂水解,溶解不完全。
3.嚴格按照規定的說明進行滅菌。避免過度滅菌,這可能導致凝膠變軟。
菌落沒有長出
因為培養基的原因:
1.培養基反復熔化
2.過度加熱
3.不充分的混勻
4. 因成分稀釋,而未能彌補其鑒別特性
6.使用了不正確的配方
1.避免反復重熔。在給定時間內只復溶需要量的培養基。
2.不要過熱。
3.確保適當的混勻。
4.使用適量的接種菌量。請勿在有效期過后使用菌液制備用培養基。
6.根據說明書使用規定量的培養基。
因為增補劑的原因:
1.增補劑過期或變質
2.增補劑未很好的復溶。所加濃度不夠。增補劑添加不正確,如培養基過熱或濃度有誤。
3.增補劑未正確與培養基混勻。
1.在效期內使用增補劑。
2.根據說明書上的規定,使用規定量的增補劑,配置為規定濃度。
3.確保增補劑與培養基正確混勻。
培養基顏色變化(含指示劑的培養基)
培養基pH值在滅菌前后沒有在規定的范圍內
1.檢查用于制備蒸餾水的水的pH值。蒸餾水pH值應在6.0-7.0之間。
2.在pH漂移的情況下,可使0.1N Cl/0.1N NaOH調節pH。
培養基有沉淀
通常發生在含無機鹽的培養基
1.建議使用蒸餾水溶解干粉培養基。也可以使用純凈水。
2.推薦條件之外的培養基過熱或過度滅菌,會導致沉淀。
3.這通常在含有磷酸鹽的培養基上觀察到。應該進行水的兼容性檢查。
制備好的培養基儲存時變暗
1.培養基含糖濃度高,并被持續加熱
2.培養基存儲溫度高
1.不要過熱
2.應按照推薦的時間和溫度進行滅菌
3.避免持續地熔化
4.避免所配制的培養基長時間暴露于50°C以上的高溫。
流體硫乙醇酸鹽培養基中的環不勻稱或環發生扭曲(M009)
1. 瓊脂消化不當
2. 沸騰不足
1.高壓前保證瓊脂顆粒的完全消化,以避免出現相分離。
2. 正確消化、高壓和冷卻,不擾動培養基,才會形成密致環。
制備好的流體硫乙醇酸鹽培養基(M009)有松弛環
配制好的培養基的擾動
再加熱和冷卻后,環可恢復原來的形狀
在高壓滅菌罐中,流體硫乙醇酸鹽培養基有雙環形成
因為氧氣吸收
確保正確夾緊底部通氣口。如果松動,吸收大氣中的氧氣會導致雙環形成。
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