梭菌顯色培養(yǎng)基的應(yīng)用

產(chǎn)氣莢膜梭菌( Clostridium perfringens) 是一種革蘭陽性厭氧菌，能夠引起食物中毒和壞死性腸炎等疾病。該菌是臨床上氣性壞疽病原菌中最常見的一種梭菌，在體內(nèi)能形成莢膜，能分解肌肉和結(jié)締組織中的糖，產(chǎn)生大量氣體，從而導(dǎo)致組織嚴(yán)重氣腫，繼而影響血液供應(yīng)，造成組織大面積壞死。美國(guó)疾病預(yù)防控制中心數(shù)據(jù)顯示，產(chǎn)氣莢膜梭菌已成為繼彎曲菌和沙門菌之后的又一大引起細(xì)菌性食物中毒的常見致病菌。

產(chǎn)氣莢膜梭菌也是一種重要的飲用水指示菌，我國(guó)《食品安全國(guó)家標(biāo)準(zhǔn) 飲用天然礦泉水檢驗(yàn)方法》GB8538—2016規(guī)定，天然礦泉水產(chǎn)品和水源水中必須檢測(cè)產(chǎn)氣莢膜梭菌。

目前國(guó)內(nèi)對(duì)產(chǎn)氣莢膜梭菌的檢測(cè)主要利用的是傳統(tǒng)的生化培養(yǎng)方法，如利用液體硫乙醇酸鹽培養(yǎng)基(FT)、亞硫酸鹽-多粘菌素-磺胺嘧啶瓊脂基礎(chǔ) (SPS)以及胰?-亞硫酸鹽-環(huán)絲氨酸瓊脂基礎(chǔ)(TSC)進(jìn)行分離培養(yǎng)，步驟較多且需要大量復(fù)雜的確認(rèn)實(shí)驗(yàn)，整個(gè)過程至少需要 4天時(shí)間，不利于檢測(cè)部門及時(shí)報(bào)告結(jié)果 ，嚴(yán)重影響產(chǎn)氣莢膜梭菌檢測(cè)的效率及準(zhǔn)確性。

梭菌顯色培養(yǎng)基（貨號(hào)：M2026，HiCrome? Clostridial Agar Base）【需添加劑：產(chǎn)氣莢膜桿菌添加劑II（貨號(hào)：FD012，Perfringens Supplement II）】根據(jù)該菌產(chǎn)生特異性酶，從而快速對(duì)產(chǎn)氣莢膜梭菌進(jìn)行定性和定量分析。與傳統(tǒng)培養(yǎng)基相比，產(chǎn)氣莢膜梭菌顯色培養(yǎng)基具有更高的準(zhǔn)確性和更快的檢測(cè)速度，厭氧條件下35-37℃孵育24-48小時(shí)，即可觀察接種反應(yīng)（如下圖）。產(chǎn)氣莢膜梭菌顯色培養(yǎng)基利用該菌產(chǎn)生特異性酶，其特異性和靈敏度均較高，在初級(jí)分離中就可以對(duì)產(chǎn)氣莢膜梭菌進(jìn)行分離與鑒定。

培養(yǎng)基中的胰蛋白胨提供必需的營(yíng)養(yǎng)素，主要是氮源化合物。酵母提取物作為B族維生素的來源。葡萄糖是可發(fā)酵的碳水化合物。硫乙醇酸鈉是還原劑，有助于產(chǎn)生低氧還電位，從而促進(jìn)梭菌的生長(zhǎng)。此外，培養(yǎng)基通過添加額外成分，能很好地支持梭菌屬的繁茂生長(zhǎng)。而選擇性添加劑可以抑制其他腸道細(xì)菌生長(zhǎng)繁殖。

接種梭菌瓊脂的理想方法是用樣品（在管中）直接接種在無菌冷卻的培養(yǎng)基上，或者劃線接種。

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