檢測水中單增李斯特氏菌的HiMedia顯色培養(yǎng)基

現(xiàn)在，市面上能見到的顯色培養(yǎng)基大多用于食品和臨床，但HiMedia廠家生產(chǎn)的顯色培養(yǎng)基覆蓋面廣，能用于供水行業(yè)和環(huán)境監(jiān)測站。下面為您介紹一下。

顯色培養(yǎng)基的評價(jià)常有多個(gè)指標(biāo)，如靈敏度，特異性等，它們也與所檢測的樣本類型有關(guān)。生產(chǎn)廠家經(jīng)常不提供這些指標(biāo)。但一些第三方檢測中心或研究機(jī)構(gòu)對此則有相關(guān)研究，并發(fā)表在專業(yè)期刊上。

2011年，《學(xué)術(shù)研究國際期刊》發(fā)表了一篇對顯色培養(yǎng)基的比較研究。作者來自埃及國家研究中心水污染研究部，他們通過用顯色培養(yǎng)基檢測了水中的單核細(xì)胞增生李斯特氏菌，對顯色培養(yǎng)基進(jìn)行了評價(jià)（見參考文獻(xiàn)1）。

作者指出，單核細(xì)胞增生李斯特菌是廣泛存在的食品致病菌，致死率較高（＞20%）。它從家禽、鱒魚、壁虱、甲殼類，水、污水、植被、食品中已能被分離出來。對于人類而言，食品和水是常見的致病源。

傳統(tǒng)的培養(yǎng)法分離李斯特菌屬費(fèi)力耗時(shí)，需要增菌乃至預(yù)增菌使水中低豐度的單增李斯特菌得到恢復(fù)。顯色培養(yǎng)基的出現(xiàn)可改善這一檢測方法。

研究者收集了尼羅河地表水的60個(gè)水樣本。收集水平遵照了200年APHA發(fā)布的指南。所有水樣均收集在無菌的1L玻璃瓶中（Simax品牌，捷克共和國產(chǎn)），并在4℃條件下運(yùn)輸?shù)綄?shí)驗(yàn)室。所有樣品在收集后6小時(shí)內(nèi)進(jìn)行細(xì)菌學(xué)檢查。

研究用的單增李斯特氏菌標(biāo)準(zhǔn)菌株編號為NCTC 10890。研究者采用了HiMedia公司生產(chǎn)的HiCrome Listeria Agar Base（以下簡稱HLA）。這款顯色培養(yǎng)基基于李斯特菌特有的β葡萄糖苷酶與鼠李糖發(fā)酵。β葡萄糖苷酶裂解顯色底物，使得李斯特菌屬菌落呈現(xiàn)藍(lán)色，而其他菌屬為白色。李斯特菌的內(nèi)部鑒別是基于鼠李糖發(fā)酵。單核細(xì)胞增生李斯特菌為藍(lán)綠色菌落。研究者還采用了另一個(gè)公司生產(chǎn)的BBL CHROMagar顯色培養(yǎng)基（以下簡稱BBL）。

研究遵循了2005年APHA指南，采用薄膜過濾法對單核細(xì)胞增生李斯特氏菌進(jìn)行了檢測和計(jì)數(shù)。濾膜放置在培養(yǎng)基上，37℃倒置孵育24小時(shí)。對典型菌落計(jì)數(shù)，單位為CFU/100 ml。菌落的進(jìn)一步確證采用PCR法。最終計(jì)算得出靈敏度（真陽性率）、特異性（真陰性率）、總有效率（即（真陽性+真陰性）×100/總數(shù)），并進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析（t檢驗(yàn)）。

結(jié)果見表1、表2、表3和表4。

表1. 在不同培養(yǎng)基上，單增李斯特氏菌標(biāo)準(zhǔn)菌株的菌落特征

表2. 非單增李斯特菌菌株在不同培養(yǎng)基上的菌落情況

表3. 培養(yǎng)基分離標(biāo)準(zhǔn)菌株的有效性

表4. 60個(gè)尼羅河水樣在不同培養(yǎng)基上單增李斯特菌的假陽性率

由上表可見，HiMedia的李斯特菌顯色培養(yǎng)基（HiCrome Listeria Agar Base）靈敏度為96.8%，特異度為100%，并已被PCR進(jìn)一步確證，令人滿意，且好于另外一種品牌的顯色培養(yǎng)基。作者認(rèn)為，HiMedia的李斯特菌顯色培養(yǎng)基不失為一種靈敏、快速、特異的方法，并且無須任何確證試驗(yàn)。

HiMedia公司是國際知名微生物產(chǎn)品生產(chǎn)商，具有40多年生產(chǎn)研發(fā)經(jīng)驗(yàn)，具有WHO-GMP認(rèn)證、ISO9001，ISO13485質(zhì)量體系認(rèn)證和CE、FDA注冊登記。產(chǎn)品已行銷世界上140多個(gè)國家。

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參考文獻(xiàn)

R.S. Al-Wasify, G.E.El-Taweel, M.M. Kamel, M.A.El-Laithy.Comparative Evaluation of Different Chromogenic Media for Detection of E. coli O157:H7, Listeria monocytogenes and Salmonella spp. in Water. International Journal of Academic Research. 2011,3(3):113-117