國(guó)際期刊廣泛引用的【腸桿菌科鑒定試劑盒】

中文品名：Hi25?腸桿菌科鑒定試劑盒

英文品名：Hi25? Enterobacteriaceae Identification Kit

貨號(hào)：KB003

規(guī)格：5T/盒、10T/盒、20T/盒

廠家:   HiMedia公司

用途：鑒定腸桿菌科成員（鑒定到種）

Hi25腸桿菌科鑒定試劑盒具有CE認(rèn)證和FDA注冊(cè)，并被國(guó)際期刊廣泛引用，可精準(zhǔn)鑒定腸桿菌科成員到種的水平，適合科研及食品、乳制品及制藥工業(yè)微生物鑒定使用。

概況：

KB003是一款全面的革蘭氏陰性腸桿菌科鑒定試劑盒。它在生化鑒定卡上每個(gè)孔內(nèi)都預(yù)置了迷你培養(yǎng)基和生化試劑，包含24項(xiàng)生化檢查（含13種傳統(tǒng)生化試驗(yàn)和11種糖發(fā)酵試驗(yàn)）?？變?nèi)接種的菌液生長(zhǎng)代謝后，導(dǎo)致培養(yǎng)基顏色變化。該試劑盒還提供氧化酶反應(yīng)試紙，用于氧化酶的檢查。

圖. HiMedia生產(chǎn)的菌種生化鑒定卡示意圖

第1張鑒定卡

第2張鑒定卡

使用說(shuō)明：

1）純菌培養(yǎng)

待鑒定菌種應(yīng)先進(jìn)行分離和純化?？稍跔I(yíng)養(yǎng)瓊脂（貨號(hào)M001/貨號(hào)M1274）或鑒別培養(yǎng)基如麥康凱瓊脂（貨號(hào)M082）上挑取一個(gè)菌落，接種在５ml腦心浸膏肉湯中，35-37℃培養(yǎng)4-6小時(shí)，直到在620nm處，接種液濁度≥0.1OD或0.5 McFarland標(biāo)準(zhǔn)。一些苛養(yǎng)菌可能需要6小時(shí)以上的孵育時(shí)間，以保證接種液濁度≥0.1OD

2）氧化酶實(shí)驗(yàn)

采用試劑盒提供的氧化酶紙片（貨號(hào)DD018）進(jìn)行氧化酶檢查。挑取一個(gè)菌落，接觸和摩擦氧化酶紙片。10秒內(nèi)出現(xiàn)深紫色為陽(yáng)性反應(yīng)。10秒-60秒出現(xiàn)顏色變化表明為延遲的陽(yáng)性反應(yīng)。60秒后出現(xiàn)顏色變化或無(wú)變化為陰性反應(yīng)。氧化酶試驗(yàn)必須完成，它是整個(gè)鑒定體系的一部分。

3）接種菌液并培養(yǎng)

無(wú)菌環(huán)境下打開(kāi)試劑盒，撕掉封條。在生化鑒定卡上每孔接種50μl上述菌液。也可用接種環(huán)劃線。35℃-37℃孵育18-24小時(shí)。

4）添加輔助試劑

以下試驗(yàn)在18-24小時(shí)孵育期結(jié)束后，添加如下輔助試劑（試劑盒提供輔助試劑）。

a.苯丙氨酸脫氨試驗(yàn)：第5個(gè)孔

加2-3滴TDA試劑（貨號(hào)R036）。1分鐘內(nèi)出現(xiàn)深綠色為陽(yáng)性。無(wú)顏色變化為陰性。

b.硝酸鹽還原試驗(yàn)：第6個(gè)孔

加1-2滴對(duì)氨基苯磺酸（貨號(hào)R015）和1-2滴N,N-二甲基-1-萘胺（貨號(hào)R009）立即出現(xiàn)粉紅色為陽(yáng)性，顏色無(wú)變化為陰性。

c.伏-普試驗(yàn)：第9個(gè)孔

加2-3滴Barritt試劑A(貨號(hào)R029)和1滴Barritt試劑B（貨號(hào)R030）5-10分鐘內(nèi)出現(xiàn)粉紅色為陽(yáng)性，無(wú)顏色變化或?yàn)闇\銅色為陰性。

d.甲基紅試驗(yàn)：第10個(gè)孔

加1-2滴甲基紅試劑（貨號(hào)I007）

試劑保持紅色為陽(yáng)性

試劑脫色變黃為陰性

e.吲哚試驗(yàn)：第11個(gè)孔

加1-2滴Kovac試劑（貨號(hào)R008）。10秒內(nèi)出現(xiàn)粉紅色為陽(yáng)性。試劑保持淺白色為陰性。

5）讀取結(jié)果

顯色結(jié)果與《結(jié)果詮釋表》比對(duì)，確定是否存在陽(yáng)性反應(yīng)。再根據(jù)《菌種標(biāo)準(zhǔn)表》完成鑒定。

可鑒定的腸桿菌科菌種：

水生布戴約維采菌（Budvicia aquatica）

鄉(xiāng)間布丘氏菌（Buttiauxella agrestis）

戴氏西地西菌（Cedecea davisae）

拉氏西地西菌（Cedecea lapagei）

奈氏西地西菌（Cedecea neteri）

無(wú)丙二酸檸檬酸桿菌（Citrobacter amalonaticus）

差異檸檬酸桿菌（Citrobacter diversus）

弗氏檸檬酸桿菌（Citrobacter freundii）

產(chǎn)氣腸桿菌（Enterobacter aerogenes）

河生腸桿菌生物1群（Enterobacter amnigenus (Biogroup I)

河生腸桿菌生物2群（Enterobacter amnigenus (Biogroup II)

泰勒腸桿菌或生癌腸桿菌Enterobacter taylorae (E. cancerogenus)

陰溝腸桿菌（Enterobacter cloacae）

日溝維腸桿菌（Enterobacter gergoviae）

阪崎腸桿菌（Enterobacter sakazakii）

大腸埃希氏菌（Escherichia coli）

非活潑型大腸埃希氏菌Escherichia coli, inactive）

螳螂埃希氏菌（Escherichia blattae）

弗格森埃希氏菌（Escherichia fergusonii）

赫爾曼埃希氏菌（Escherichia hermanii）

傷口埃希菌（Escherichia vulneris）

美洲愛(ài)文菌（Ewingella americana）

蜂房哈夫尼菌（Hafnia alvei）

產(chǎn)酸克雷伯氏菌（Klebsiella oxytoca）

肺炎克雷伯菌臭鼻亞種Klebsiella pneumoniae subspecies ozaenae

肺炎克雷伯菌肺炎亞種（Klebsiella pneumoniae subspecies pneumoniae）

肺炎克雷伯菌鼻硬結(jié)亞種（Klebsiella pneumoniae subspecies rhinoscleromatis）

土生克雷伯氏菌（Klebsiella terrigena）

抗壞血酸克呂沃菌（Kluyvera ascorbata）

非脫羧勒克氏菌（Leclercia adecarboxylata (Escherichia adecarboxylata) ）

摩氏摩根菌摩氏亞種（Morganella morganii subspecies morganii）

摩氏摩根菌塞氏亞種（Morganella morganii subspecies sibonii）

成團(tuán)泛菌（Pantoea agglomerans）

分散泛菌（Pantoea dispersa）

奇異變形桿菌（Proteus mirabilis）

產(chǎn)粘變形桿菌（Proteus myxofaciens）

潘尼變形桿菌（Proteus penneri）

普通變形桿菌（Proteus vulgaris）

產(chǎn)堿普羅維登斯菌（Providencia alcalifaciens）

雷極普羅維登斯菌（Providencia rettgeri）

拉氏普羅維登斯菌（Providencia rustigianii）

水生拉恩菌（Rahnella aquatilis）

邦戈?duì)柹抽T(mén)氏菌（Salmonella bongori）

豬霍亂沙門(mén)氏菌亞利桑那亞種（Salmonella choleraesuis subspecies arizonae）豬霍亂沙門(mén)氏菌豬霍亂亞種（Salmonella choleraesuis subspecies choleraesuis）

豬霍亂沙門(mén)氏菌雙相亞利桑那亞種（Salmonella choleraesuis subspecies diarizonae）

豬霍亂沙門(mén)氏菌豪頓亞種（Salmonella choleraesuis subspecies houtenae）

豬霍亂沙門(mén)氏菌印度亞種（Salmonella choleraesuis subspecies indica）

豬霍亂沙門(mén)氏菌薩拉姆亞種（Salmonella choleraesuis subspecies salamae）

腸炎沙門(mén)氏菌（Salmonella enteritidis）

傷寒沙門(mén)氏菌（Salmonella typhi）

鼠傷寒沙門(mén)氏菌Salmonella typhimurium

蟲(chóng)媒沙雷菌（Serratia entomophila）

無(wú)花果沙雷菌（Serratia ficaria）

居泉沙雷菌（Serratia fonticola）

粘質(zhì)沙雷菌（Serratia marcescens）

氣味沙雷菌1型（Serratia odorifera 1）

氣味沙雷菌2型（Serratia odorifera 2）

普城沙雷菌（Serratia plymuthica）

變形斑沙雷菌（Serratia proteamaculans）

深紅沙雷菌（Serratia rubidaea）

鮑氏志賀氏菌、福氏志賀氏菌、痢疾志賀氏菌（Shigella boydii, Shigella flexneri, Shigella dysenteriae）

宋內(nèi)氏志賀菌（Shigella sonnei）

小腸結(jié)腸炎耶爾森氏菌（Yersinia enterocolitica）

費(fèi)氏耶爾森菌（Yersinia frederiksenii）

中間耶爾森菌（Yersinia intermedia）

鼠疫耶爾森菌（Yersinia pestis）

假結(jié)核耶爾森氏菌（Yersinia pseudotuberculosis）