微生物法測定維生素B12，要用優(yōu)質(zhì)培養(yǎng)基

維生素B12，是人體必需維生素，在維持機體正常造血和神經(jīng)功能健全中起到至關(guān)重要的作用。因此，對于嬰幼兒配方乳品和營養(yǎng)補充食品中，測定維生素B12十分必要。

我國《GB 5413.14—2010食品安全國家標(biāo)準(zhǔn) 嬰幼兒食品和乳品中維生素B12的測定》規(guī)定了采用萊士曼氏乳酸桿菌（ATCC 7830）測定維生素B12的整個流程。實際亦有多篇報道，肯定了微生物法的準(zhǔn)確可靠，并且測定樣品還包括腸內(nèi)營養(yǎng)粉劑、多維元素片、維生素飲料以及含乳飲料等［1-4］。

微生物法的原理是，根據(jù)試驗菌株對微生物B12的特異性和靈敏性，在含有除維生素B12以外所有營養(yǎng)的【測定培養(yǎng)基】中，加入標(biāo)準(zhǔn)曲線工作液以及未知待測樣品溶液，根據(jù)微生物生長產(chǎn)生的透光率，對待測樣本中微量的微生物B12進(jìn)行測定。

其中，測量的準(zhǔn)確度尤其依賴于維生素B12在一定濃度范圍內(nèi)與透光率呈現(xiàn)良好的線性關(guān)系。而是否呈良好的線性，又與所用的【測定培養(yǎng)基】有很大的關(guān)系。有機構(gòu)采用了不同品牌的【維生素B12測定培養(yǎng)基】進(jìn)行測定，發(fā)現(xiàn)兩個國產(chǎn)品牌培養(yǎng)基的接種空白依然有生長，勉強可獲得標(biāo)準(zhǔn)曲線，但線性結(jié)果不理解。而進(jìn)口品牌的“標(biāo)準(zhǔn)曲線明顯梯度正生長, 獲得較理想的標(biāo)準(zhǔn)曲線, 線性結(jié)果較理想”［5］。

參考文獻(xiàn)

1. 蔣孟虹，許蘋，秦峰，劉浩，楊美成. 微生物法測定腸內(nèi)營養(yǎng)粉劑中微量維生素B12的含量［J］.食品安全質(zhì)量檢測學(xué)報,2016,7(3):893-897

2. 盧京光，裴琳，楊龍華．在線微生物濁度法測定多維元素片中微量維生素B12的含量[J]．藥物分析雜志,2011,031(009):1837-1839

3. 陳亞波，周敏，楊彤．微生物法測定維生素飲料中的維生素B12[J]．浙江農(nóng)業(yè)科學(xué)，2013,000(007):863-865

4. 林耀文，佘之蘊，李姣，蘇妙儀，范安妮，張施敬，王力清．微生物法測定含乳飲料中維生素B12含量[J]．飲料工業(yè),2013,016(004):39-42

5. 陳緒華, 劉健, 江一飛. 不同測定培養(yǎng)基對維生素B12線性的影響[J]. 生物技術(shù)世界, 2013(04):53+131

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生產(chǎn)商HiMedia Laboratories是全球**的微生物培養(yǎng)基供應(yīng)商，

生產(chǎn)工藝均通過WHO-GMP、ISO9001、ISO13485認(rèn)證，

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產(chǎn)品信息

中文：維生素B12測定用培養(yǎng)基

英文：Vitamin B12 Assay Medium

品牌：HiMedia?

規(guī)格：100G/瓶

貨號：M036

儲存溫度：8℃下密閉保存，理想是放置于干燥器中。

質(zhì)控

該產(chǎn)品出廠前經(jīng)廠家嚴(yán)格檢測，確保合格后方予放行。具體質(zhì)控包括：

外觀（粉末顏色、均一度、是否結(jié)塊）

溶水后的培養(yǎng)基顏色和透明度

pH值（8.5% 水溶液，25℃）

培養(yǎng)反應(yīng)（對萊士曼乳酸桿菌ATCC 7830 在35-37℃培養(yǎng)18-24小時）

生長試驗（用美國藥典維生素B12標(biāo)準(zhǔn)品，每管分別加入0.0,0.025,0.050,0.075,0.1,0.125,0.150和0.2ng，觀察菌株的連續(xù)生長狀況，在620nm測定吸光度）

（注：分別為對照，空白，標(biāo)準(zhǔn)品1，標(biāo)準(zhǔn)品3，標(biāo)準(zhǔn)品5）

優(yōu)勢

該產(chǎn)品不含痕量維生素B12，有效避免標(biāo)準(zhǔn)曲線偏移和本底過高，結(jié)果準(zhǔn)確可靠。