胎牛血清中的外泌體參與細(xì)胞的增殖

外泌體（Exosome）是近年研究的熱點(diǎn)，它是新發(fā)現(xiàn)的一種細(xì)胞通訊的形式。外形上看，它是30-150nm的小囊泡，里面卻攜帶著多種蛋白質(zhì)、RNA和脂類等重要信息。

它由活細(xì)胞分泌，進(jìn)入到血清、唾液、尿液、羊水等多種生物體液中，進(jìn)而影響鄰近或遠(yuǎn)處的細(xì)胞。

圖. 外泌體作為一種小囊泡，參與細(xì)胞間的通訊。

圖片來(lái)自：Gra?a Raposo.Extracellular vesicles: Exosomes, microvesicles, and   friends.J Cell Biol. 2013 Feb 18; 200(4): 373–383

胎牛血清是常用的細(xì)胞培養(yǎng)基添加成分，它富含多種營(yíng)養(yǎng)，滿足細(xì)胞粘附、生長(zhǎng)、增殖、解毒等需求。胎牛血清中也含有外泌體，并可能對(duì)所培養(yǎng)細(xì)胞具有一定作用。

2020年，有文獻(xiàn)報(bào)道了胎牛血清外泌體對(duì)成骨細(xì)胞的增殖起促進(jìn)作用，則確證了血清中的外泌體確實(shí)在細(xì)胞培養(yǎng)中發(fā)揮一定的作用。（文獻(xiàn)1）

該實(shí)驗(yàn)的研究設(shè)計(jì)如下：

一、外泌體的提取和確證

取15 mL胎牛血清，通過(guò)超速離心100000xg獲得外泌體，0.22μm過(guò)濾清洗后，將外泌體溶于100μlPBS中。并進(jìn)行透射電子顯微鏡觀察，以及后期WB檢測(cè)標(biāo)志蛋白確證。

二、細(xì)胞培養(yǎng)

小鼠胚胎成骨前體細(xì)胞MC3T3-E1細(xì)胞，前期用含10%胎牛血清的α-MEM培養(yǎng)液培養(yǎng)，傳代。選取狀態(tài)良好的第3代細(xì)胞用于后續(xù)實(shí)驗(yàn)。

三、細(xì)胞分組培養(yǎng)

對(duì)照組：胎牛血清（不含外泌體）+ α-MEM

外泌體組：在以上基礎(chǔ)上另加入10 mg/L胎牛血清外泌體。

四、細(xì)胞檢測(cè)

用CCK-8檢測(cè)細(xì)胞增殖，WB檢測(cè)細(xì)胞骨形態(tài)發(fā)生蛋白2、骨橋蛋白。

結(jié)果顯示，24h后，外泌體組細(xì)胞增殖明顯高于對(duì)照組。同時(shí)，促進(jìn)成骨的蛋白因子，如骨形態(tài)發(fā)生蛋白2和骨橋蛋白的表達(dá)水平明顯增高。

作者指出：胎牛血清外泌體對(duì)成骨細(xì)胞的增殖起到促進(jìn)作用，可為臨床治療骨破壞提供新思路。同時(shí)，國(guó)外的研究表明，使用祛除外泌體的胎牛血清培養(yǎng)細(xì)胞，大多數(shù)細(xì)胞的生長(zhǎng)速率均降低，提示血清中的外泌體在細(xì)胞生長(zhǎng)及存活方面起到一定的作用（文獻(xiàn)2）。

明星產(chǎn)品：Ausbian?特級(jí)胎牛血清

Ausbian?特級(jí)胎牛血清被各大科研院所、高校重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室及藥廠廣泛使用，多年來(lái)持續(xù)穩(wěn)定供應(yīng)細(xì)胞典藏等重大項(xiàng)目。

產(chǎn)品描述：

1. 內(nèi)毒素含量極低（≤3EU/ml）(國(guó)際規(guī)定：特級(jí)胎牛血清＜10EU/ml)。

2. 極利于細(xì)胞的生長(zhǎng)與傳代，適合各類細(xì)胞培養(yǎng)。

3. 每個(gè)批號(hào)血清均具有完整的檢驗(yàn)報(bào)告。

4. 七次無(wú)菌過(guò)濾，最后三次為0.1μm無(wú)菌過(guò)濾處理。

5. 進(jìn)行細(xì)菌、真菌、支原體、病毒及病毒抗體檢測(cè)，符合國(guó)際動(dòng)物協(xié)會(huì)要求。

6. 每批次產(chǎn)量為1500瓶-2500瓶，保證大多數(shù)項(xiàng)目?jī)赡瓴恍钃Q批次，細(xì)胞試驗(yàn)數(shù)據(jù)穩(wěn)定。