支原體DNA抽提Kit特點及操作步驟 -威正翔禹

在細(xì)胞實驗中，如果懷疑細(xì)胞有支原體污染，可直接取細(xì)胞上清進(jìn)行支原體PCR檢測。因為存在支原體污染的細(xì)胞上清中，支原體密度為通常為10^6-10^8個/ml，已足以用于PCR檢測。但有時，支原體檢測前，還需對樣品中的支原體DNA進(jìn)行提取。那么，什么時候需要提取呢？

當(dāng)出現(xiàn)以下幾種情況時，建議大家在進(jìn)行支原體qPCR前，先進(jìn)行提取支原體提取。

1、細(xì)胞培養(yǎng)液中存在抑制PCR的物質(zhì)，這時就需要提取。細(xì)胞培養(yǎng)基中的血清濃度如果超過12%，那么對下游的PCR反應(yīng)會產(chǎn)生抑制。酚紅，對熒光定量PCR的檢測也會干擾。這些均可以通過使用Miverva公司的支原體DNA提取試劑盒來克服。

2、對于樣品類型是細(xì)胞團(tuán)、疫苗、凍存細(xì)胞和石蠟包埋的組織，也需要提前提取DNA。

3、另外，如果樣品中蛋白含量高于10mg/ml，則先需要用蛋白酶K進(jìn)行處理。

締一生物小編今天給大家介紹支原體DNA抽提Kit 英文名稱：MinervaVenorGeM Sample Preparation Kit貨號：56-1010

德國支原體DNA抽提Kit試劑盒可從細(xì)胞上清和生物制品中分離支原體DNA，全程只需30分鐘。該試劑盒符合歐洲藥典規(guī)范。

分四步組成：

**步細(xì)胞溶解

第二步DNA特異性與層析柱結(jié)合

第三步祛除殘留的污染物和抑制劑

第四步洗脫DNA。

需要注意的是，常規(guī)細(xì)菌和哺乳動物細(xì)胞的DNA提取試劑盒是否能用于支原體DNA提取，值得懷疑。因為如果都提取出來，則會對下游PCR檢測帶來干擾。總之，提取后的DNA應(yīng)具有一定的純度和產(chǎn)率。

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