細(xì)胞培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)前期準(zhǔn)備工作內(nèi)容

細(xì)胞實(shí)驗(yàn)前期的準(zhǔn)備很重要，有計(jì)劃的準(zhǔn)備和了解細(xì)胞實(shí)驗(yàn)過(guò)程，才能把細(xì)胞養(yǎng)好。下面詳細(xì)說(shuō)說(shuō)細(xì)胞實(shí)驗(yàn)前期需要準(zhǔn)備的事項(xiàng)：

1、準(zhǔn)備無(wú)菌環(huán)境

千里之堤潰于蟻穴，細(xì)菌、真菌、支原體等微生物的生長(zhǎng)速度塊和破壞力強(qiáng)，會(huì)破壞細(xì)胞結(jié)構(gòu)，影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果。使用紫外線照射、定期用專用試劑進(jìn)行實(shí)驗(yàn)室清潔等，都有助于降低細(xì)胞污染的風(fēng)險(xiǎn)。

2、了解細(xì)胞的生長(zhǎng)習(xí)性

不同的細(xì)胞生長(zhǎng)習(xí)性不同。如成纖維細(xì)胞是貼壁生長(zhǎng)，有一定的密度依賴性，密度小可能會(huì)出現(xiàn)不增殖，狀態(tài)差的情況，接種密度大時(shí)則需要隔天傳代，頻繁傳代則影響細(xì)胞狀態(tài)；再如RPMI-8226人多發(fā)性骨髓瘤細(xì)胞，是懸浮生長(zhǎng)的，傳代需離心棄去上清即可。總之，了解細(xì)胞生長(zhǎng)習(xí)性，再加上正確的計(jì)數(shù)，才能掌握好傳代的密度。

3、選擇正確的培養(yǎng)基

在養(yǎng)細(xì)胞之前，就要了解，你所養(yǎng)細(xì)胞的來(lái)源以及種類和名稱。

選擇正規(guī)途徑來(lái)源的細(xì)胞，索取細(xì)胞培養(yǎng)條件，并查閱文獻(xiàn)，確定所需培養(yǎng)液種類以及是否需要添加特殊成分，常用的細(xì)胞培養(yǎng)液有DMEM、RPMI1640、F12等等，一些常見(jiàn)的細(xì)胞基本可以使用這幾種培養(yǎng)基中的一種來(lái)培養(yǎng)，有的需要加入一定其他成分，這需要根據(jù)不同的細(xì)胞類型，查ATCC細(xì)胞庫(kù)或者查文獻(xiàn)，才能找到所需**培養(yǎng)液。選擇正確的培養(yǎng)液是養(yǎng)好細(xì)胞的**步。

4、選擇優(yōu)質(zhì)的血清

血清中含有細(xì)胞生長(zhǎng)所必須的生長(zhǎng)因子，作為哺乳動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的附加物，血清的添加是十分重要的，因此，選擇優(yōu)質(zhì)的血清，是細(xì)胞培養(yǎng)成功與否的關(guān)鍵！Ausbian進(jìn)口胎牛血清，內(nèi)毒素含量低，澳洲血源，全程冷鏈運(yùn)輸，為細(xì)胞培養(yǎng)保駕護(hù)航。