3大類支原體檢測標(biāo)準(zhǔn)品的區(qū)別及用途

歐洲藥典第2.6.7章（EP 2.6.7）和日本藥典第G3章（JP G3）詳細(xì)描述了用于支原體的核酸擴(kuò)增技術(shù)（NAT）等檢測方法。如果將這些檢測方法用作傳統(tǒng)培養(yǎng)法的替代方法，在靈敏度方面，要求在樣品體積中每毫升檢測到10個菌落形成單位（CFU/ml）。

德國Minerva Biolabs公司的的10CFU靈敏度標(biāo)準(zhǔn)品含有滅活支原體(10CFU標(biāo)準(zhǔn)品3管/盒)，用于評判實驗的靈敏度。

使用時重懸在感興趣的樣品基質(zhì)中(如EP 2.6.7 / JP G3)，用所應(yīng)用的方法進(jìn)行陽性測試。大量實驗表明，核酸法檢測中，支原體DNA提取可以幫助實驗實現(xiàn)更高的靈敏度，提取后的10CFU提取物可直接用于PCR。

德國MB公司生產(chǎn)的特異性標(biāo)準(zhǔn)品（1管支原體基因組DNA（≈10ng）+ 1管 Tris緩沖液（200μl）/盒）中，含有從目標(biāo)微生物中，以低培養(yǎng)傳代數(shù)提取的基因組DNA。用標(biāo)準(zhǔn)化的方法分析DNA起始物質(zhì)，以確定DNA的完整性和數(shù)量。最終的DNA提取部分測序，以確認(rèn)物種的身份。

德國MB公司生產(chǎn)的特異性標(biāo)準(zhǔn)品，用于PCR和qPCR方法對支原體物種的特異性檢查。

PCR定量標(biāo)準(zhǔn)包含從定義的微生物中提取的基因組DNA，在低培養(yǎng)傳代數(shù)。用標(biāo)準(zhǔn)化的方法分析DNA起始物質(zhì)，以確定DNA的完整性和數(shù)量。只有瓊脂糖凝膠中顯示> 10 kb條帶且OD260/280 > 1.8的純完整DNA才能用于制造這些產(chǎn)品。DNA被部分測序以確認(rèn)物種的身份。

德國MB公司的PCR定量標(biāo)準(zhǔn)包含目標(biāo)微生物基因組拷貝的制定數(shù)量。因此，德國MB公司的定量標(biāo)準(zhǔn)品非常適合在qPCR中生成DNA標(biāo)準(zhǔn)曲線。