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核酸檢測(cè)熒光pcr法是什么意思2024-04-10 14:51
![]() 核酸檢測(cè)熒光PCR法,也稱為實(shí)時(shí)熒光定量PCR(real-time fluorescent quantitative PCR,qPCR)技術(shù),是一種用于檢測(cè)核酸的方法。它是基于聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(PCR)法的延伸,通過(guò)在反應(yīng)體系中加入熒光物質(zhì),利用專門儀器實(shí)現(xiàn)實(shí)時(shí)熒光檢測(cè),并對(duì)模板進(jìn)行定量計(jì)算。這種方法可以對(duì)待檢測(cè)樣本中的核酸進(jìn)行擴(kuò)增,從而更容易檢測(cè)出支原體。 熒光PCR法包括嵌入熒光染料法和熒光探針?lè)ǎS玫臒晒馊玖嫌星逗闲筒伙柡蜔晒馊玖?/span>SYBR GreenⅠ和飽和熒光染料ResoLight、Eva Green等,而常用的熒光探針包括TaqMan熒光探針、TaqMan MGB探針、鎖核酸(locked nucleotide acid, LNA)探針等。
締一生物提供的德國(guó)MB支原體熒光PCR檢測(cè)試劑盒(qPCR)均為探針?lè)z測(cè),依據(jù)操作步驟的細(xì)微差別, 分『經(jīng)典法』和『一步法』兩種。 此兩類試劑盒較全球其他廠家同類產(chǎn)品,具有以下獨(dú)特的優(yōu)點(diǎn): ①經(jīng)典法支原體熒光PCR檢測(cè)試劑盒遵循歐洲藥典流程要求 ②高特異性,一次檢測(cè)即可涵蓋了所有可能感染細(xì)胞的支原體物種(涵蓋歐洲藥典規(guī)定的9種支原體),根據(jù)序列一致性,至少可以檢測(cè)到107種支原體物種。操作簡(jiǎn)單,易于觀察(使用MB的試劑盒,下表中列出的支原體物種均為陽(yáng)性,其他微生物或真核細(xì)胞均為陰性,無(wú)交叉反應(yīng))。 ③高靈敏度,MB公司的支原體qPCR檢測(cè)試劑盒經(jīng)典法最低檢測(cè)限可達(dá)到≤10CFU/ml。 MB公司的支原體qPCR檢測(cè)試劑盒一步法最低檢測(cè)限≥50個(gè)基因組/反應(yīng)。 ④MB公司有相應(yīng)配套的10CFU/100CFU的敏感度測(cè)試的標(biāo)準(zhǔn)品,便于方法學(xué)驗(yàn)證。 ⑤MB公司有相應(yīng)配套的支原體基因組DNA和細(xì)菌基因組DNA,便于特異性驗(yàn)證。 ⑥MB公司有相應(yīng)配套的支原體絕對(duì)定量標(biāo)準(zhǔn)品,便于最后定量檢測(cè)。
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