如何快速鑒別細(xì)胞污染類型

細(xì)胞污染通常指的是細(xì)胞培養(yǎng)中的生物污染，主要類型包括細(xì)菌污染、真菌污染、支原體污染、黑膠蟲污染和病毒污染等。以下是一些快速鑒別細(xì)胞污染類型的方法：

觀察培養(yǎng)液的變化：

細(xì)菌污染：培養(yǎng)液一般會(huì)渾濁變黃，稍微振蕩后可見培養(yǎng)基表面有漂浮物。

真菌污染：培養(yǎng)液通常保持清亮，不變色，但可見淡黃色或白色漂浮在培養(yǎng)基表面的點(diǎn)狀菌落。

支原體污染：培養(yǎng)液一般會(huì)渾濁，但細(xì)胞病變不很明顯，只是慢慢死去。

黑膠蟲污染：在低倍鏡下觀察時(shí)可見黑色小點(diǎn)，高倍鏡下可看見黑色的小蟲游來游去。

顯微鏡觀察：

細(xì)菌污染：在高倍鏡下可見桿狀或球狀的細(xì)菌在培養(yǎng)基中游動(dòng)。

真菌污染：鏡下可見絲狀物，有些像珊瑚狀，慢慢會(huì)長(zhǎng)出很細(xì)的黑色絲狀物。

支原體污染：在鏡下呈黑色微小顆粒，多位于細(xì)胞與細(xì)胞之間。

熒光染色法觀察：

支原體污染：用熒光染料與DNA特異地結(jié)合，可使支原體內(nèi)的DNA著色，熒光顯微鏡下支原體成綠色小點(diǎn)，散于細(xì)胞周圍或附于細(xì)胞表面。

其他檢測(cè)方法：

電鏡檢測(cè)：條件許可時(shí)，可用掃描電鏡或投射電鏡觀察支原體污染。

培養(yǎng)檢測(cè)：對(duì)于支原體污染，可以將細(xì)胞懸液加入支原體肉湯培養(yǎng)基，觀察肉湯培養(yǎng)基有無霧狀沉淀，然后進(jìn)行分離培養(yǎng)觀察有無特定菌落出現(xiàn)。

PCR和ELISA等分子生物學(xué)方法：可以檢測(cè)病毒、細(xì)菌和真菌等微生物的核酸和蛋白質(zhì)等分子特征，從而可以快速準(zhǔn)確地檢測(cè)到污染物。

細(xì)胞生長(zhǎng)和形態(tài)觀察：

注意觀察細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)和形態(tài)的變化，如生長(zhǎng)緩慢、細(xì)胞變圓脫落等，可能是污染的表現(xiàn)。