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支原體污染的細胞培養(yǎng)物能用于實驗嗎2024-06-03 16:14
支原體污染的細胞培養(yǎng)物不能用于實驗。以下是詳細的解釋和歸納: 支原體污染對細胞的影響: 支原體污染會導致細胞生長緩慢、形態(tài)改變,甚至引起細胞死亡。 支原體可以大量消耗培養(yǎng)基中的營養(yǎng)和細胞代謝的基礎成分,如核酸前體、氨基酸、維生素、脂質、膽固醇等,導致細胞增殖緩慢及各種代謝、功能紊亂甚至喪失。 支原體還會吸附在細胞表面,破壞細胞膜的完整性,更有少數(shù)類型支原體可進入細胞內,如發(fā)酵支原體、生殖支原體和肺炎支原體。 對實驗結果的影響: 被支原體污染的細胞無法用于得出準確的實驗數(shù)據(jù)。 支原體污染會干擾細胞的代謝過程,影響細胞的功能和表達,從而干擾實驗結果的分析和解讀。 支原體還可能作為外源性因素,對實驗結果產(chǎn)生潛在的干擾,使研究者難以區(qū)分細胞的內在變化與外界因素的影響。 檢測支原體污染: 支原體污染在普通光學顯微鏡下難以被發(fā)現(xiàn),細胞被污染早期不會表現(xiàn)出明顯的“癥狀”。 目前常用的檢測方法有:DNA染色法、支原體培養(yǎng)法、PCR法(包括凝膠電泳和熒光定量)、化學發(fā)光法等。但需要注意的是,這些方法雖然可靠,但實驗周期可能較長。 綜上所述,支原體污染的細胞培養(yǎng)物不能用于實驗,因為支原體污染會嚴重影響細胞的生長、代謝和功能,進而干擾實驗結果的準確性和可靠性。因此,在細胞培養(yǎng)過程中,需要采取一系列預防措施來避免支原體污染,如加強實驗室的清潔和消毒工作、選擇質量可靠的培養(yǎng)基和血清等培養(yǎng)材料、實驗操作人員嚴格遵守實驗室規(guī)范等。如果懷疑細胞培養(yǎng)物被支原體污染,應立即進行檢測并采取相應的處理措施。
對于費力擴增的細胞(如已轉染,或經(jīng)過體外刺激),如果細胞中發(fā)現(xiàn)有支原體污染,但此細胞又不愿丟棄,希望繼續(xù)培養(yǎng),推薦使用MB公司生產(chǎn)的復合抗生素Zell Shield?。 細胞祛除支原體試劑Zell Shield使用方法: (1)在每次使用Zell Shield?之前,細胞傳代時,先使用廠家推薦的“懸浮沖洗法”處理好細胞,再使用加了Zell Shield?的培養(yǎng)基養(yǎng)細胞,能達到更好的祛除支原體的效果(“懸浮沖洗法”的詳細步驟,見下文)。 (2)Zell Shield?常規(guī)為-18℃保存,建議使用前,先融化分裝,仍舊-18℃避光保存,使用時按需融化配制。避免反復凍融。 (3)Zell Shield?按1:100濃度可直接加入培養(yǎng)基。例如:500ml培養(yǎng)基中添加5ml Zell Shield?,50mL/瓶的Zell Shield?可供5L培養(yǎng)基使用。 北京締一生物科技有限公司國內總代Ausbian品牌,德國Minerva-Biolabs微生物污染控制系列。細胞培養(yǎng)實驗使用的Ausbian澳洲進口特級胎牛血清,新生牛血清,干細胞培養(yǎng)基,馬血清,德國MB支原體檢測/祛除試劑盒,DNA污染祛除試劑,支原體PCR/qPCR定量試盒等產(chǎn)品。歡迎訪問締一生物官網(wǎng):www.dyshengwu.com。聯(lián)系電話:4006661688。
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