Actin與GAPDH做內(nèi)參區(qū)別

Actin與GAPDH作為內(nèi)參在多個(gè)方面存在區(qū)別，以下將分別從定義、分布、作用、結(jié)構(gòu)和應(yīng)用等方面進(jìn)行詳細(xì)闡述：

定義：

Actin（肌動(dòng)蛋白）：是細(xì)胞的一種重要骨架蛋白，分子量約為42kDa，基本上存在于所有真核細(xì)胞中。它作為內(nèi)參是指為了衡量基因組數(shù)據(jù)的可靠性，使用序列保守性來測(cè)定從基因組中提取的某些基因的表達(dá)水平作為參考。

GAPDH（甘油醛-3-磷酸脫氫酶）：是一個(gè)管家基因，在物種間是高度保守的。例如，人源的GAPDH由335個(gè)氨基酸組成，其全長有70%與Arabidopsis thaliana中由422個(gè)氨基酸組成的同源蛋白是相同的。GAPDH在western blot和PCR中都被用作參照。

分布：

Actin：主要分布于細(xì)胞骨架中，是細(xì)胞運(yùn)動(dòng)、維持細(xì)胞形態(tài)和細(xì)胞分裂的重要成分。

GAPDH：廣泛分布于各種組織中的細(xì)胞，存在于胞漿、細(xì)胞核、核周區(qū)及膜上。

作用：

Actin：β-Actin是PCR常用的內(nèi)參，其抗體也是Western Blot很好的內(nèi)參指數(shù)。

GAPDH：被廣泛用作抽提total RNA，poly(A)+ RNA，Western blot等實(shí)驗(yàn)操作的標(biāo)準(zhǔn)化的內(nèi)參。但值得注意的是，缺氧可上調(diào)GAPDH的表達(dá)，導(dǎo)致GAPDH聚集，因此不能在涉及氧氣的相關(guān)研究中作為內(nèi)參。

結(jié)構(gòu)：

Actin與GAPDH在分子結(jié)構(gòu)和氨基酸序列上存在顯著差異，具體結(jié)構(gòu)細(xì)節(jié)需要查閱相關(guān)生物學(xué)資料。

應(yīng)用：

Actin：主要應(yīng)用于生物化學(xué)與分子生物學(xué)、氨基酸、多肽與蛋白質(zhì)、細(xì)胞生物學(xué)等領(lǐng)域。

GAPDH：除了作為內(nèi)參用于實(shí)驗(yàn)標(biāo)準(zhǔn)化外，其蛋白印跡法也常用于實(shí)驗(yàn)分析中。

總結(jié)來說，Actin和GAPDH作為內(nèi)參在定義、分布、作用、結(jié)構(gòu)和應(yīng)用上均有明顯的區(qū)別。在選擇內(nèi)參時(shí)，應(yīng)根據(jù)實(shí)驗(yàn)的具體需求和條件，綜合考慮這些因素，選擇最適合的內(nèi)參。