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PCR實驗室中的氣溶膠污染從何而來?

2024-06-18 17:01

PCR實驗室中的氣溶膠污染主要來源于兩個過程:樣本制備過程和PCR擴增過程。

樣本制備過程:

樣本液體面與空氣摩擦時可形成氣溶膠。在樣本制備過程中,較劇烈地搖動反應管、開蓋時、吸樣時及加樣器的反復吸樣都可能形成氣溶膠,從而引發(fā)污染。

待測強陽性樣品,尤其是放置樣品的容器被污染或容器密封不嚴導致樣品與外界接觸被污染,以及待提取樣本中含有高濃度的陽性核酸,也容易形成氣溶膠造成污染。

PCR擴增過程:

PCR擴增可以引起實驗室中擴增產(chǎn)物的累積。通常一次典型的PCR擴增可以產(chǎn)生高達109拷貝的靶序列,如果氣溶膠化,甚至最小的氣溶膠都會含有106拷貝的擴增產(chǎn)物。

如果不加以控制,在短期內累積的氣溶膠化擴增產(chǎn)物就會污染實驗室中的試劑、儀器設備和通風系統(tǒng)。

氣溶膠污染在PCR實驗室中是一個嚴重的問題,因為即使是極微量的污染也足以造成實驗結果假陽性,進而可能導致臨床做出錯誤的判斷和決策,并可能引發(fā)后續(xù)的醫(yī)療事故和恐慌。

為了避免PCR實驗室中的氣溶膠污染,需要采取一系列嚴格的實驗室管理措施,如建立標準的正負壓系統(tǒng)及四分區(qū)(或三分區(qū))的PCR實驗室,確保在無菌無塵環(huán)境下進行操作,以及加強實驗室人員的培訓和監(jiān)管等。


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