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細胞實驗室如何預防支原體污染?

2024-07-18 15:46

在拿到細胞到開始培養的過程中,預防支原體污染應注意以下幾點:

1.新購產品檢測

新到的細胞、培養基、血清都可以做一下簡單的污染檢測后再開始實驗。另外要注意每次試劑量配制不宜過多,建議分裝使用,分裝時用針頭濾器過濾一次。

2.控制環境污染

要保證實驗室和培養箱的潔凈,按時殺菌,可以用酒精擦拭和紫外照射的方法。必要時可以通臭氧過夜。

3.嚴格無菌操作

進行實驗操作時一定要按照實驗室的要求,確保無菌操作。感冒咳嗽時盡量不要使用細胞房,如果必須使用,請在實驗后徹底清潔消毒使用空間。準備好細胞房專業潔凈衣,戴好口罩和手套。

所有進超凈臺的物品**都用酒精擦拭一遍,超凈臺里面的東西一定要盡量少放,東西太多會影響超凈臺內空氣流通及空氣除菌細胞培養基和器材要保證無菌;

4.最小化抗生素使用頻率

非珍貴細胞污染直接丟棄,避免抗生素濫用導致抗藥性產生。

支原體污染細胞后,特別是重要的細胞株,有必要清除支原體,常用方法有抗生素處理、抗血清處理、抗生素加抗血清和補體聯合處理。

支原體最突出的結構特征是沒有細胞壁,一般來講,對作用于細胞壁生物合成的抗生素,如內酰胺類、萬古霉素等完全不敏感;對多粘菌素(polymycin)、利福平、磺胺藥物普遍耐藥。對支原體最有抑制活性、常用于支原體感染治療的抗生素是四環素類、大環內酯類及一些氟喹諾酮。

支原體污染在細胞培養中實際上是比較常見的, 據資料, 可達30%甚至更高。支原體污染時細胞表現為長得不好,也不死亡, 同時, 培養基又是清亮的。時間長達一周也沒有什么變化。這時基本上可以判斷出是支原體污染了, 愿意檢測就檢測一下,不愿意直接用清除試劑處理。

避免細胞污染,可以從預防著手,超凈工作臺物品放置要合理、進入細胞房要換鞋,穿實驗服,實驗員戴手套后要用酒精消毒、避免細胞交叉污染等。

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