對(duì)不同牛齡采血得到的牛血清性能也不同

牛血清是細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程中重要的培養(yǎng)基，其質(zhì)量的好壞影響著細(xì)胞狀態(tài)。常用的牛血清包括胎牛血清、新生牛血清及小牛血清，分別對(duì)不同牛齡采血，小牛血清的采集對(duì)象是出生1年之內(nèi)的小牛，新生牛血清是出生24小時(shí)至2周內(nèi)的新生牛，胎牛血清則是6-10個(gè)月的胎牛。

隨著采血年齡的增加，牛血清中的生長(zhǎng)因子減少，抗體和補(bǔ)體等含量增加。因此，鑒別血清原料的采血年齡段，防止成牛血清的參入是血清品質(zhì)檢測(cè)者所面臨的一個(gè)重要問(wèn)題。

有研究人員通過(guò)不同年齡段的牛血清在不同濃度下對(duì)SP2/0細(xì)胞株培養(yǎng)效果的比較試驗(yàn)，用**增殖濃度、倍增時(shí)間、克隆率等指標(biāo)來(lái)推斷樣品血清的采血年齡段，其結(jié)果如下：

SP2/0細(xì)胞株為鼠骨髓瘤細(xì)胞。首先，研究人員在無(wú)菌條件下，將7個(gè)供試血清0.22μm過(guò)濾除菌，然后將供試血清按10％、8％、6％、4％、2％的濃度分別加到MEM培養(yǎng)基稀釋好的細(xì)胞懸液中使細(xì)胞濃度為1×104／ml。充分混勻后在96孔細(xì)胞培養(yǎng)板中每孔接種0.2ml，每個(gè)試驗(yàn)樣接種8孔。每24 h記數(shù)一孔，共記數(shù)7d。研究人員又將供試血清按8％的血清濃度加到MEM培養(yǎng)基稀釋好的細(xì)胞懸液中，將SP2／0細(xì)胞稀釋到5個(gè)／mL，分別接種到96孔細(xì)胞培養(yǎng)板中，每孔0.2mL，每個(gè)供試血清樣品接種48孔，一周后計(jì)數(shù)克隆生成孔數(shù)。

結(jié)果顯示，在克隆率方面，采血年齡越小，效果越好，胎牛血清培養(yǎng)的細(xì)胞克隆率為85.4%，6h新生牛血清為79.1%，6月齡小牛血清為50%。在促細(xì)胞生長(zhǎng)效應(yīng)方面，隨著血清濃度從2%提高到10%，細(xì)胞**增殖數(shù)不斷升高，倍增時(shí)間縮短。血清濃度相同時(shí)，采血年齡約越小，細(xì)胞數(shù)最高，倍增時(shí)間越短。不同年齡段的牛血清對(duì)促細(xì)胞生長(zhǎng)效應(yīng)的影響呈現(xiàn)比較明顯的差異性。

上海威正翔禹生物公司提供的Ausbian牛血清為澳洲進(jìn)口，血清經(jīng)過(guò)嚴(yán)格質(zhì)控，如檢測(cè)總蛋白、支原體、牛病毒性腹瀉病毒、牛副流感病毒等，并經(jīng)0.22m過(guò)濾和gamma射線(xiàn)照射，指標(biāo)達(dá)標(biāo)，經(jīng)廣泛使用，受到好評(píng)。