特殊細(xì)胞試驗(yàn)對(duì)培養(yǎng)基的要求

放射性同位素32P常用于細(xì)胞信號(hào)的轉(zhuǎn)導(dǎo)研究。由于磷酸化是常見的蛋白修飾和信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)形式，因此，32P標(biāo)記的磷酸鹽可摻入到被磷酸化修飾的蛋白中而被檢測(cè)到，從而反映出磷酸化蛋白的濃度。在這一過程中，具體位點(diǎn)的磷酸化以及上游的作用信號(hào)都是待驗(yàn)證的因素。在該研究中，模型細(xì)胞、帶有突變位點(diǎn)的轉(zhuǎn)染質(zhì)粒、捕獲蛋白和磷酸化蛋白的標(biāo)簽抗體，以及放射自顯影、電泳和蛋白免疫印跡是一連串的研究工具和方法。最終顯示為在這個(gè)位點(diǎn)上的磷酸化激活的確證（如下圖）。

該實(shí)驗(yàn)避免了使用抗磷酸化的抗體，避免了因抗體的親和力不強(qiáng)導(dǎo)致的實(shí)驗(yàn)失敗。而放射性同位素又具有很高的靈敏度，因此盡管具有放射性，在許多領(lǐng)域仍有應(yīng)用。

在這類實(shí)驗(yàn)中，由于要向細(xì)胞培養(yǎng)液中加入32P標(biāo)記的磷酸鹽，以摻入到細(xì)胞中，因此培養(yǎng)基中需要祛除固有的磷酸鹽，同時(shí)又保留細(xì)胞所需的其他營(yíng)養(yǎng)（如生長(zhǎng)因子、細(xì)胞外基質(zhì)等）。由于胎牛血清含有各類小分子，因此過濾掉小分子的透析胎牛血清常用于該類實(shí)驗(yàn)中的細(xì)胞培養(yǎng)。

北京締一生物公司代理的Ausbian?透析胎牛血清選自澳洲低毒素批次的特級(jí)胎牛血清，經(jīng)半透膜透析而成，祛除了10Kda以下包括磷酸鹽在內(nèi)的小分子，因而可更好地用于同位素?fù)饺朐囼?yàn)。

Ausbian?透析胎牛血清有100ml/瓶和500ml/瓶不同規(guī)格，每個(gè)批次提供完整的檢測(cè)報(bào)告。全程冷鏈運(yùn)輸，不出現(xiàn)凍融現(xiàn)象，保證質(zhì)量不受影響。

Ausbian?透析胎牛血清出廠前的質(zhì)檢包括：

1）理化檢查（如pH值、血紅蛋白、總蛋白、白蛋白、球蛋白、IgG和內(nèi)毒素）

2）無菌檢查，包括細(xì)菌、真菌、支原體檢查

3）病毒檢查，包括牛藍(lán)舌病毒、牛病毒性腹瀉病毒等十二項(xiàng)指標(biāo)

4）生化檢查，包括葡萄糖、甘油三酯和膽固醇

5）促細(xì)胞生長(zhǎng)試驗(yàn)

6）BVD1型和2型抗體檢查

總之，對(duì)于上述提到的一些特殊的細(xì)胞實(shí)驗(yàn)，應(yīng)選用質(zhì)量合格的透析胎牛血清來培養(yǎng)細(xì)胞，不干擾同位素?fù)饺朐囼?yàn)，又能保證細(xì)胞的培養(yǎng)效果。